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          秀珍菇液體菌種制備技術

          發布時間:2020-06-01

            來源:中國食用菌商務網

              一、工藝流程
              母種→原種(液體搖瓶)→生產種(罐體發酵)→料棒接種
              二、母種的制備
              1、母種培養基配方
              馬鈴薯(去皮)20%,葡萄糖2%,瓊脂2%,水1 000毫升,pH值5.5~6。
              2、母種的制備及注意事項
              按配方準確稱取原料,加熱煮沸最后定容,分裝試管,裝入量約為試管長度的1/4~1/5,塞好棉塞。使用高壓滅菌鍋滅菌,在溫度121℃、壓力0.11Mpa下滅菌半小時,注意一定要放凈高壓滅菌鍋內的冷空氣。滅菌后,待培養基溫度下降至60℃時,將成把的試管擺成斜面。注意,不要讓培養基粘濕棉塞。
              要嚴格按照無菌操作規程進行接種,然后置于恒溫箱中25℃左右恒溫培養10~15天。
              三、原種的制備
              1、原種培養基配方
              馬鈴薯(去皮)20%、麥麩3%、葡萄糖2%、蛋白胨3‰、磷酸二氫鉀2‰、硫酸鎂1‰。
              2、原種的制備及注意事項
              馬鈴薯去皮切片后與麥麩一起煮沸20分鐘,過濾定容,加入其它原料,全部溶解后裝入三角瓶。三角瓶在使用前除清洗之外,還要進行空滅,滅菌方法與常規滅菌試管培養基相同。每個瓶中放入5~10粒玻璃球(直徑0.5cm),用棉塞塞緊瓶口,再用牛皮紙包裹后扎緊。使用高壓滅菌鍋滅菌,在溫度121℃、壓力0.11Mpa下滅菌45分鐘。
              冷卻后進行無菌接種,然后置于25℃恒溫培養箱中靜置培養72小時。搖床培養時,溫度25℃,轉速140轉/分鐘,培養時間72~96小時。
              四、生產種的制備
              1、生產種培養基配方
              馬鈴薯(去皮)20%、麥麩2%、蛋白胨3‰、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀1‰、硫酸鎂0.5‰、石膏0.5‰、瓊脂2~3g、酵母膏0.5‰、消泡劑1‰。
              2、生產種的制備
              (1)清洗罐體
              發酵罐在每次使用后都必須進行徹底的清洗,去除罐內殘存的菌球、菌塊料液等雜物,保證罐內潔凈。
              (2)配制原料
              按照生產種培養基配方準確稱取各種原料。馬鈴薯去皮切片后與麥麩一起煮沸20分鐘,過濾定容,再加入其它原料及消泡劑。
              (3)滅菌
              將盛有培養基質的發酵罐推進滅菌倉,通入蒸汽進行滅菌,控制溫度在121℃左右、壓力為0.11Mpa,滅菌1個小時。
              (4)冷卻
              培養基滅菌完畢后,開啟滅菌倉,將發酵罐推進冷卻室進行降溫,當溫度降至25℃時即可進行接種操作。
              (5)接種
              將發酵罐推到層流罩下,先用酒精噴燈發酵罐接種口消毒,再迅速打開原種瓶并用噴燈將瓶口消毒,打開接種口閥門,將菌種注入發酵罐,然后迅速關閉接種閥門。
              (6)恒溫培養與觀察
              接種結束后將發酵罐推到培養區,連接通氣閥等。通過進氣閥和排氣閥將通風量調節至1:0.5V/V~1.2V/V(料液體積/空氣體積)。調節罐壓保持在0.02Mpa~0.04Mpa。培養溫度控制在25℃左右。
              接種24小時以后,每隔12小時可從接種口取樣1次,觀察菌種萌發和生長情況。采用顯微鏡,低倍、高倍、油鏡,觀察菌絲生長狀況和有無雜菌污染,發現異常及時處理。
              菌種恒溫培養7天左右即可使用接種栽培袋。如果液體生產種不能立即使用,可以在12~15℃條件下暫時保存2~3天。(來源:菌農網)

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